ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ ବ୍ୟାଖ୍ୟା
ପଦାଙ୍କ 1 ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ |
1.1 ସମାଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତି ଧୋଇ ଦିଅ |
କାର୍ଯ୍ୟର ଏକାଗ୍ରତା ଧୋଇବା ତରଳ | : ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ, ଧୋଇବା ସମାଧାନକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ (20-25 ଡିଗ୍ରୀ) ପୁନ restored ସ୍ଥାପିତ କରାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ ଏହାକୁ ସମାନ କରିବା ପାଇଁ ସମାନ ଭାବରେ ହଲାଇବା|ତା’ପରେ ବିଶୁଦ୍ଧ ଜଳ ସହିତ 20 ଗୁଣ ଏକାଗ୍ର ଧୋଇବା ଦ୍ରବଣକୁ ମିଶ୍ରିତ କରନ୍ତୁ (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 5 ମି.ଲି.
1.2 ନମୁନା ପ୍ରସ୍ତୁତି |
Animal ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପଶୁ ରକ୍ତ ନିଆଯାଇଥିଲା, 4000rpm ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ଅଲ ern କିକ ଶକ୍ତି ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା|ହେମୋଲାଇସିସ୍ ବିନା ସେରମ୍ ମଧ୍ୟ ପ୍ରାକୃତିକ ଭାବରେ ଜମା ହୋଇପାରେ |
The ସେରମ୍ ନମୁନା 1:25 କୁ ମିଶ୍ରିତ କରନ୍ତୁ (120ul ନମୁନା diluent ରେ 5ul ସେରମ୍ ନମୁନା ମିଶାନ୍ତୁ) ଏବଂ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ |
ଟିପନ୍ତୁ: ନକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣଗୁଡିକ ମିଶ୍ରିତ ହେବା ଆବଶ୍ୟକ ନୁହେଁ |
1.3 ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି |
ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ 1:25 କୁ ମିଶ୍ରିତ କରନ୍ତୁ (5ul ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ କୁ 120ul ଏନଜାଇମ୍ diluent ରେ ମିଶାନ୍ତୁ) ଏବଂ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ |
1.4 ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ
En ଏନଜାଇମ୍ ଲେବଲ୍ ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ନିଅନ୍ତୁ (ନମୁନା ସଂଖ୍ୟା ଅନୁଯାୟୀ, ବିଛିନ୍ନ ହୋଇ ଅନେକ ଥର ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ), ଏନଜାଇମ୍ ଲେବଲ୍ ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରେ 100ul ମିଶ୍ରିତ ସେରମ୍ ମିଶାନ୍ତୁ, ନକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ନମୁନା ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଦୁଇଟି କୂଅ ସେଟ୍ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ନକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ 100ul ଯୋଗ କରନ୍ତୁ|ପ୍ଲେଟକୁ ଆଚ୍ଛାଦନ କରିବା ପାଇଁ ସିଲ୍ ପ୍ଲେଟ୍ ଚଳଚ୍ଚିତ୍ର ବ୍ୟବହାର କରି କୂଅରେ ନମୁନାକୁ ଧୀରେ ଧୀରେ ହଲାନ୍ତୁ ଏବଂ 30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 37 ଡିଗ୍ରୀରେ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
Se ସିଲ୍ ପ୍ଲେଟ୍ ଚଳଚ୍ଚିତ୍ର ଖୋଲନ୍ତୁ, ପ୍ଲେଟରେ ଥିବା ସମାଧାନକୁ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ, ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 300µl କାର୍ଯ୍ୟର ଏକାଗ୍ରତା ଧୋଇବା ତରଳ ମିଶାନ୍ତୁ, ଏବଂ ତା’ପରେ କୂଅରେ ଥିବା ତରଳ ପଦାର୍ଥକୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ|ଉପରୋକ୍ତ ପଦକ୍ଷେପଗୁଡ଼ିକୁ times ଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଶେଷରେ ଏକ ପରିଷ୍କାର ଶୋଷକ କାଗଜରେ ଶୁଖନ୍ତୁ |
Each ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 100µl ଏନଜାଇମ୍ କନଜୁଗେଟ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ, ପ୍ଲେଟ୍କୁ ଘୋଡାନ୍ତୁ ଏବଂ 45 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 37 ଡିଗ୍ରୀରେ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
Se ସିଲ୍ ପ୍ଲେଟ୍ ଚଳଚ୍ଚିତ୍ର ଖୋଲନ୍ତୁ, ପ୍ଲେଟରେ ଥିବା ସମାଧାନକୁ shake ାଡି ଦିଅନ୍ତୁ, ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 300µl କାର୍ଯ୍ୟର ଏକାଗ୍ରତା ଧୋଇବା ତରଳ ମିଶାନ୍ତୁ, ଏବଂ ତା’ପରେ କୂଅରେ ଥିବା ତରଳ ପଦାର୍ଥକୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ|ଉପରୋକ୍ତ ପଦକ୍ଷେପଗୁଡ଼ିକୁ times ଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଶେଷରେ ଏକ ପରିଷ୍କାର ଶୋଷକ କାଗଜରେ ଶୁଖନ୍ତୁ |
ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 100µl ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ, ପ୍ଲେଟ୍କୁ ଘୋଡାନ୍ତୁ ଏବଂ ଆଲୋକଠାରୁ 37 ଡିଗ୍ରୀ ଦୂରରେ 10 ମିନିଟ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 50µl ଷ୍ଟପ୍ ସମାଧାନ ଯୋଡନ୍ତୁ, ଏବଂ 5 ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଫଳାଫଳ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରନ୍ତୁ |
ଷ୍ଟେପ୍ 2 ଫଳାଫଳ ବ୍ୟାଖ୍ୟା
ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅର OD450 ମୂଲ୍ୟ 96-କୂଅ ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରିଡର୍ ଉପରେ ପ was ଼ାଗଲା |
2.1 ବ id ଧତା
ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ହାରାହାରି OD450nm ମୂଲ୍ୟ ଥିଲା |<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 ଗଣନା ପଦ୍ଧତି |
ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନା ପାଇଁ, ସଂଶୋଧିତ ନମୁନା ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମୂଲ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରି ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ S / P ଗଣନା କରନ୍ତୁ:
S / P=(OD) |ନମୁନା - OD |ଏନସି ) / (ODPC - OD |ଏନସି )
2.3 ଫଳାଫଳ ବ୍ୟାଖ୍ୟା
ଯେତେବେଳେ S / P<0.15, it is judged as negative.
ଯେତେବେଳେ S / P 0.25 ଠାରୁ ବଡ କିମ୍ବା ସମାନ, ଏହା ସକରାତ୍ମକ ଭାବରେ ବିଚାର କରାଯାଏ |
ଯେତେବେଳେ 0.15 S / P ଠାରୁ କମ୍ କିମ୍ବା ସମାନ |<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
ଗରମ ଟ୍ୟାଗ୍ |: ପର୍ସିନ୍ ସର୍କୋଭାଇରସ୍ ପ୍ରକାର - ⅱ ଆଣ୍ଟିବଡି ଏଲିସା ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍, ଚାଇନା ପର୍ସିନ୍ ସର୍କୋଭାଇରସ୍ ପ୍ରକାର - ⅱ ଆଣ୍ଟିବଡି ଏଲିସା ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍ ଯୋଗାଣକାରୀ, ନିର୍ମାତା, କାରଖାନା |
